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La distribution du MAC du complexe Mycobacterium avium-intracellulare dans les résidences a été étudiée. Le MAC n’a été récupéré que dans les salles de bains mais pas dans les autres résidences. Le taux d’apparition dans les salles de bains des patients atteints de MAC pulmonaire était significativement plus élevé. patients, les génotypes d’isolats environnementaux étaient identiques à leurs isolats cliniques respectifs

En outre, nous avons comparé le taux de récupération entre les maisons des patients et celles des volontaires sains. Nous avons également comparé les isolats récupérés des maisons des patients avec ceux des maisons des patients. échantillons Nous avons recueilli des échantillons de la résidence de chaque individu, y compris des échantillons liés à l’approvisionnement en eau, soit trois échantillons d’eau, chacun provenant du robinet de la cuisine, de la pomme de douche et de l’eau de la baignoire utilisée. En outre, nous avons recueilli la poussière des climatiseurs en tant que huitième échantillon environnemental. Les participants étaient des patients ambulatoires souffrant d’une maladie pulmonaire MAC n = et volontaires sains sans maladie pulmonaire n = Les patients et les sujets témoins partageaient le même système d’approvisionnement en eau, désinfectés au chlore La salle de bain était séparée des toilettes de chaque résidence Tous les patients et les bénévoles vivaient avec leur famille et n’étaient pas les seules personnes à utiliser les salles de bains dans chaque résidence. Les patients recevaient un diagnostic de MAC maladie pulmonaire selon les critères de diagnostic American Thoracic Society de patients, étaient des fumeurs, et aucun était alcoolique; Les lésions radiographiques étaient des lésions nodulaires bronchectasiques chez les patients et les lésions fibrocavitaires chez les patients Quarante-sept des patients avaient déjà subi une chimiothérapie multidrogue, y compris la thérapie à la clarithromycine, mais des cultures d’échantillons d’expectoration de patients avaient une tuberculose pulmonaire prédisposant à une tuberculose pulmonaire. Le consentement informé a été obtenu de tous les participants avant la collecte des échantillons. Cette étude a été approuvée par le comité d’examen institutionnel du Toneyama National Hospital d’Osaka, au Japon et est conforme aux directives internationales pour les études impliquant des sujets humains. Les échantillons d’eau ont été centrifugés à à ° C, et les pastilles de l’eau du robinet ou de l’eau de douche ont ensuite été mises en suspension dans du tampon phosphate pH de pH, dont μL a été inoculé sur une plaque de gélose Middlebrook H contenant% glycérol,% enrichissement en acide oléique-albumine-dextrose-catalase Becton Dickinson moyen, U / ml de polymyxine B,% d’amphotéricine B,% d’acide nalidixique,% de triméthoprime et% d’azlocilline H PANTA La pastille de l’eau de bain utilisée a été traitée avec des mL de solution d’hydroxyde de sodium pendant min. l’échantillon traité, centrifugé à g pendant min puis remis en suspension dans un mL de tampon phosphate Les échantillons prélevés sur les écouvillons ont été mis en suspension dans des mL de bouillon de soja trypsique puis incubés à ° C pendant h, suivi d’un traitement alcalin et les granulés ont été ensuite mises en suspension dans des mL de solution tampon phosphate. Cent à μL de ces suspensions ont été inoculés sur des plaques H PANTA et incubées à ° C pendant des semaines. Les colonies en croissance ont été examinées au microscope par coloration de Ziehl-Neelsen. analyse de la région de l’espaceur interne de l’ARNr S-S Des analyses génotypiques ont été effectuées en utilisant le polymorphisme de longueur de fragment de restriction et PFGE , comme décrit précédemment, avec mi ni modifications de la méthode de PFGE de la composition de tampon de lyse contenant du lysozyme mg / ml, M de NaCl, mmol / L Tris / HCl, M de pH EDTA,% de polyoxyéthylène cétyl éther,% de désoxycholate, et% N-lauroyl sarkosylMAC a ont été classés en sérovars sur la base des glycopeptidolipides antigéniques GPL présents sur la surface cellulaire Les sérovars de MAC isolés à partir d’échantillons résidentiels et d’expectorations ont été identifiés par chromatographie en phase liquide / spectrométrie de masse Dans certains cas, nous avons trouvé GPL apolaire au lieu de la GPL sérospécifique Apolar GPL n’a pas d’oligosaccharides sérospécifiques dans la GPL La distribution du MAC isolé a été analysée avec les valeurs de test P & & lt; t; Onze échantillons contiennent des isolats MAC: de l’eau de douche, de la pomme de douche, de l’eau de la baignoire et du drain de la salle de bain. Aucun isolat n’a été trouvé dans les échantillons. autres isolats MAC provenaient de% des résidences des patients, alors que seul l’isolat% a été trouvé dans les résidences des volontaires sains dans l’eau de la baignoire. Ainsi, les isolats MAC ont été récupérés des résidences des patients à une fréquence significativement plus élevée que les résidences témoins les sujets P = des isolats MAC des résidences, étaient M avium, et étaient M intracellulare Ce rapport de M avium à M intracellulare parmi les isolats environnementaux reflète les caractéristiques des patients atteints de MAC pulmonaire à Osaka, Japon

Récupération de Mycobacterium avium-intracellulare complexe MAC de différentes zones résidentiellesTable Agrandir la photoTélécharge de Mycobacterium avium-intracellulare complexe MAC de différentes zones résidentiellesTen MAC isolats des salles de bains des patients ont été analysés et comparés avec des isolats de leurs échantillons d’expectoration respectifs par génotypage et sérotypage Pour les patients, les isolats MAC d’échantillons d’eau et d’expectoration ont des profils moléculaires identiques par polymorphisme de longueur de fragment de restriction et d’analyse PFGE et présentent le même sérovar. Les deux patients ont subi une chimiothérapie complète mais ont conservé une positivité MAC faible par intermittence, Déterminés par culture d’échantillons d’expectoration Les deux patients présentaient des lésions fibrocavitaires. Chez les patients, les isolats MAC des salles de bains et des échantillons d’expectoration étaient les mêmes mais étaient différents en termes de polymorphisme de longueur de fragment de restriction ou de PFGE prof stimulant. Pour les patients restants, les isolats de MAC des salles de bains étaient des espèces différentes du tableau des isolats cliniques respectifs de ces derniers patients, avaient une bronchiectasie nodulaire et avaient des antécédents de tuberculose pulmonaire Des isolats MAC provenant des salles de bains des patients ont été identifiés comme sérovars , , , ou ; ceux-ci avaient été le plus souvent détectés dans les échantillons d’expectoration de patients atteints de MAC qui ont été signalés dans notre étude précédente

Figure Vue largeDownload slideMotification moléculaire des isolats MAC du complexe Mycobacterium avium-intracellulare environnementaux et cliniques Les analyses de polymorphisme de longueur de fragment de restriction ont été réalisées par Southern blot de l’ADN génomique digéré par PvuII sondé avec les couloirs IS A et IS B et les isolats de la baignoire Isolats de l’eau de la baignoire, du drain de salle de bain et d’un échantillon d’expectoration des voies patient et, Isolés de l’eau de douche et d’un échantillon d’expectoration des voies patient et, Isolats de l’eau de la baignoire et échantillon d’expectoration du patient Voies et isolats de l’eau de douche et échantillon d’expectoration des patients C et D, profils PFGE des isolats MAC cliniques et environnementaux des patients, et grands profils de fragments de restriction de l’ADN génomique digérés avec XbaI C et DraI D Lanes et isolats M intracellulare de la pomme de douche et un échantillon d’expectoration des voies patients et, des isolats de M avium de l’eau de la baignoire et un sputu M échantillons provenant des patients Patients -, isolats de M en provenance de l’eau de la baignoire, drain de salle de bain et échantillon d’expectoration du patient M, marqueur des étalons d’ADN λ Agrandir la photoType dactylographique du complexe Mycobacterium avium-intracellulare environnemental et clinique MAC isolats A et B, Restriction analyses de polymorphisme de longueur de fragment ont été effectuées par Southern blot de l’ADN génomique digéré par PvuII sondé avec IS A et IS B Lanes et, isolats de l’eau de la baignoire et un échantillon de crachats des voies patient -, isolats de l’eau de la baignoire, Isolés de l’eau de la douche et d’un échantillon d’expectoration des voies patient et, isolats de l’eau de la baignoire et d’un échantillon d’expectoration des voies patient et, isolats de l’eau de douche et d’un échantillon de crachat des patients C et D et les isolats MAC environnementaux des patients, et les grands profils de fragments de restriction de l’ADN génomique digérés avec XbaI C et DraI D Lan Les isolats de M intracellulare provenant de la pomme de douche et d’un échantillon d’expectoration provenant des voies réservées aux patients et des isolats de M en provenant de l’eau de la baignoire et d’un échantillon d’expectoration provenant des patients. , marqueur des étalons d’ADN λ

Table View largeTélécharger la présentation des profils phénotypiques et génotypiques des souches MAC du complexe Mycobacterium avium-intracellulare isolées des salles de bains des patients et de leurs isolats cliniques respectifsTable View largeTélécharger la diapositiveTarifs des profils phénotypiques et génotypiques des souches MAC du complexe Mycobacterium avium-intracellulare isolées des salles de bains des patients et de leurs isolats cliniques respectifs La possibilité a été suggérée que MAC peut coloniser les systèmes d’eau urbains, où le développement de biofilms de mycobactéries non tuberculeuses a été observé Cependant, nous n’avons pu obtenir aucun isolat de MAC d’eau du robinet de cuisine, bien que le même Robinet de cuisine et douche dans la salle de bain En outre, les résidences familiales examinées dans cette étude n’utilisaient pas de système de recirculation d’eau chaude, qui aurait été une source d’infection MAC disséminée dans de grandes institutions, comme les hôpitaux. les résultats suggèrent que les organismes MAC La température et l’humidité dans la salle de bains peuvent fournir des conditions favorables à la croissance de MAC On sait que les organismes MAC sont résistants au chlore et à une large gamme de températures et de pH Auchuleta et al La fréquence d’obtention d’isolats de MAC chez les patients était plus faible que prévu [%] des patients. Cela pourrait être dû au fait que nous n’avons pas prélevé d’échantillons à l’intérieur de la pomme de douche ou à l’intérieur. l’entrée de la baignoire Le style traditionnel du bain japonais a une entrée d’eau sous le niveau de l’eau. Les biofilms peuvent se développer dans ces endroits, et les cultures de biofilms pourraient avoir produit des organismes MAC. le taux de détection chez les patients Sur la base de l’analyse génotypique, il a été révélé que les isolats MAC des salles de bains des patients étaient identiques à ceux Les résultats corroborent l’hypothèse d’O’Brien et coll. selon laquelle la prévalence accrue de la maladie pulmonaire MAC est liée au changement de nos habitudes d’hygiène, du bain à la douche. Néanmoins, nos résultats suggèrent que les salles de bains résidentielles pourraient être un réservoir pour les organismes MAC; nos résultats n’ont pas pu prouver que la salle de bain était une des sources d’infection de la maladie de MAC La possibilité demeure que les organismes passent du patient à leur salle de bain, au lieu que l’organisme soit la source de l’infection. En résumé, la présente étude a révélé que le MAC est plus souvent récupéré dans les salles de bain des patients que dans les salles de bains des sujets témoins, mais pas dans les autres locaux domestiques. MAC a localisé la salle de bain. , les pommes de douche et l’eau de la baignoire

Remerciements

Soutien financier L’Institut de FermentationPotential Conflits d’intérêts Tous les auteurs: pas de conflits